Очный воркшоп по сердечно-легочной реанимации
Репродукция
06.05.25
Спермограмма
Спермограмма — это комплексный лабораторный анализ эякулята, включающий оценку физических, микроскопических и биохимических показателей спермы. Исследование позволяет определить фертильность (способность к оплодотворению) самцов, выявить патологии сперматогенеза (процесса образования сперматозоидов) и диагностировать заболевания репродуктивной системы.
Автор статьи
Бунькова Софья
Кандидат ветеринарных наук, специализируется в репродукции, неонатологии и ультразвуковой диагностике.
Примечания для работы:
  • После всех вставок текстов в автолаяуты, корректно все подвинуть во всех разрешениях
  • Список литературы заполняется в десктопе здесь и видна во всех разрешениях кроме мобилок, нужно скопировать группу и вставить в конец страницы для мобилок
Показания к назначению спермограммы
1.
Бесплодие самцов — отсутствие беременностей у самок после вязок. 
2.
Оценка фертильности перед вязкой.
3.
Исследования в динамике при патологии репродуктивной системы (орхит, эпидидимит, простатит и т. д.). 
4.
Оценка материала перед криоконсервацией и после разморозки.
5.
Исследование спермы на инфекции (бруцеллез, герпес).
Методы сбора спермы
Мастурбационный метод у кобелей
Сбор материала должен осуществляться в тихом помещении в присутствии течной суки. Если кобель мелкой породы, мастурбация проводится на столе, у крупных кобелей на полу с нескользким покрытием.
Важно, чтобы у кобеля не было негативных ассоциаций с кабинетом и врачом. Не следует пытаться собирать материал после болезненных манипуляций или фиксации самца. Приучать к мануальному сбору спермы необходимо с молодого возраста, чтобы затем самец спокойно эякулировал в условиях клиники.
Техника проведения
Сначала необходимо вызвать первичную эрекцию: для этого перед носом самца ставят течную суку и параллельно производят движения крайней плотью вперед-назад, плотно обхватывая ее, но не передавливая, движения должны быть энергичными. Затем сдвигают крайнюю плоть назад для освобождения пениса. После набухания бульбус гландис формируется кольцо из большого и указательного пальцев и зажимается основание пениса за бульбус гландис. После этого ждем процесс эякуляции.
Электроэякуляция
У котов и некоторых кобелей, а также диких животных мануальный способ невозможен. В этом случае предпочтение отдается методу электроэякуляции - это метод принудительного получения спермы с помощью электрической стимуляции семявыводящих путей. Применяется в случаях, когда ручной сбор невозможен (например, при отсутствии полового поведения или стрессе у животного).
Техника проведения
Подготовка животного
  • Седация — обязательна, так как процедура болезненна. Препараты: медетомидин (80−150 мкг/кг в/м) + кетамин (5 мг/кг в/м). Альтернатива: пропофол (в/в, доза подбирается индивидуально). Подготовка кишечника: очистка прямой кишки от каловых масс.
Оборудование
  • Электроэякулятор — прибор с ректальным зондом (3 электрода);
  • Стерильные пробирки для сбора эякулята;
  • Микроскоп и нагревательный блок (37°C) для быстрой оценки спермы.
Техника
Кота укладывают на бок или спину. Зонд вводят в прямую кишку на 6−8 см (до уровня предстательной железы). Подают серию электрических импульсов: напряжение: 2−5 В. Длительность стимула: 2−3 сек, количество стимулов: 60−80 (3−4 серии по 20 импульсов). Сперму собирают в пробирку при появлении эякулята. У котов объем спермы мал (0,03−0,3 мл), поэтому важно использовать пробирки с малым объемом, обычно используется эпендорф.
Электроэякуляция - эффективный, но инвазивный метод, требующий опыта и осторожности. Осложнения: травма слизистой прямой кишки, стресс и временное снижение качества спермы. Применяется строго по показаниям, преимущественно в условиях клиники.
Катетеризация
Подготовка кота
  • Самцу требуется седация (вводится медетомидин-130-140 мг/кг, Zambelli, 2008). После седации кот должен быть расслаблен, но сохранять рефлексы.
Оборудование
  • Катетер (стерильный мочевой катетер для кошек, 3–5 Fr, длиной 10–15 см);
  • Шприц (1–2 мл) с подогретым физиологическим раствором;
  • Пробирка для сбора эякулята (стерильная, с крышкой);
  • Микроскоп и предметные стекла для оценки спермы;
  • Смазка (стерильный лубрикант на водной основе);
  • Стерильные перчатки;
  • Антисептик (хлоргексидин 0,05%, раствор йода).
  • Техника
Уложить кота на бок, отчистить препуций ватным тампоном с антисептиком, легко помассировать половой член для стимуляции эрекции (не всегда необходимо). Смазать кончик катетера лубрикантом. Осторожно ввести катетер в уретру на глубину 4−6 см (до предстательной железы). При сопротивлении не применять силу — можно травмировать уретру. Стимуляция эякуляции: подключить шприц с теплым физраствором (0,5−1 мл), медленно ввести раствор, создавая давление в уретре (имитация естественной эякуляции). Одновременно массировать основание полового члена для стимуляции семявыводящих протоков. После введения физ. раствора аккуратно аспирировать шприцем - сперма выйдет вместе с жидкостью. Собранный эякулят перенести в пробирку и сразу оценить под микроскопом. Если сперма не получена, можно повторить процедуру через 10−15 минут.
Диссекция
Диссекция – это хирургический метод получения сперматозоидов непосредственно из придатка яичка (эпидидимиса) или семенников. Применяется, когда другие способы сбора (мастурбация, электроэякуляция) невозможны или неэффективны.
Показания к диссекции
  • Азооспермия (отсутствие сперматозоидов в эякуляте) при обструкции семявыводящих путей (например, после травмы или инфекции);
  • При гибели или тяжелой болезни ценного производителя – для сохранения генетического материала.
Варианты оборудования
Фракции эякулята
Эякулят у кобелей состоит из 3 фракций. При сборе спермы важно собирать и оценивать материал по фракциям.
Первая фракция (предэякулят, уретральная фракция)
Физические свойства:
Объем: 0,5−5 мл (зависит от размера собаки и частоты спариваний). 
Цвет: прозрачная или слегка мутная жидкость.
Консистенция: водянистая, без вязкости.
pH: нейтральный или слабощелочной (7,0−7,4).
Состав:
Секрет куперовых желез (бульбоуретральных) и уретральных желез. Нет сперматозоидов (или единичные, случайно попавшие из предыдущей эякуляции). Содержит: слизь (для смазки уретры), ионы натрия, калия, хлора, незначительное количество белка.
Функция:
Очистка уретры от остатков мочи и микрофлоры, смазка полового члена перед введением во влагалище, подготовка среды для прохождения сперматозоидов.
Вторая фракция (сперматическая, основная)
Физические свойства:
Объем: 1−10 мл (зависит от породы, у крупных кобелей больше).
Цвет: молочно-белый или сероватый (из-за высокой концентрации сперматозоидов).
Консистенция: густая, вязкая.
pH: 6,3−6,7.
Состав:
Сперматозоиды (50−1500 млн/мл), секрет придатка, секрет простаты (разжижает эякулят, содержит фруктозу для питания сперматозоидов), ферменты, цитраты, простагландины.
Функция:
Оплодотворение — содержит основную массу сперматозоидов. Обеспечение подвижности и жизнеспособности спермиев. Нейтрализация кислой среды влагалища суки.
Третья фракция (простатическая, постэякулят)
Физические свойства:
Объем: 5−30 мл (может быть больше, чем вторая фракция).
Цвет: прозрачная или слегка желтоватая жидкость.
Консистенция: водянистая, иногда с хлопьями.
pH: щелочной (7,4−8,0).
Состав:
Cекрет простаты (основной компонент), нет сперматозоидов (или единичные), содержит ферменты (фибринолизин, гиалуронидазу), цинк, магний, кальций, простагландины (стимулируют сокращения матки у суки).
Функция:
Разбавление спермы — улучшает подвижность сперматозоидов, промывка уретры после эякуляции, стимуляция матки суки. У котов объем спермы меньше — 0,03−0,3 мл и на фракции сперма не разделяется. 
эксперты — практикующие специалисты
Разбираем эту и другие темы еще подробнее на курсе «Ветеринарный врач-репродуктолог»
только докмед
Исследование спермы
При оценке эякулята проводим оценку физических свойств: объем, цвет (исключаем гематоспермию и пиоспермию, уроспермию), pH, мутность.
Затем оцениваем подвижность спермиев. Важно не допускать охлаждения эякулята, что может приводить к снижению показателя подвижности, а также к гибели сперматозоидов. Нормы активно-подвижных с поступательными движениями у собак 80−90%, у кошек ≥60%. 
Переходим к оценке концентрации спермиев в 1 мл (собаки: 3000−800 млн/мл, 300−10 000 млн в эякуляте; коты: 100−5000 млн/мл.  Для фертильного спаривания суки должно быть произведено не менее 150−200 миллионов сперматозоидов. Методы подсчета концентрации: Камера Маклера (золотой стандарт), камера Горяева, фотометр SpermaCue™ (экспресс-метод). 
Следующий этап - морфология.  Для того, чтобы оценить морфологию нам необходимо покрасить материал. Для окрашивания лучше использовать специальные краски, которые помогут нам затем оценить количество живых и мертвых спермиев: Spermac Stain или окрашивание эозином-нигрозином. Норма у кобелей ≤20−30% аномальных форм сперматозоидов, у котов показатели тератоспермии могут достигать 70%. Низкие показатели морфологии спермиев у котов имеют сезонный характер и могут улучшаться к весеннему сезону размножения.
Какие дефекты сперматозоидов мы можем наблюдать у пациентов?
  • Аномалии головки (отсутствие, дублирование, шишки, кратеры);
  • Аномалии шейки (гнутая шейка, проксимальная капля);
  • Аномалии хвостика (дублирование, согнутый, свернутый хвостик и т.д.).
Дублирование головки
Интерпретация полученных результатов
Причины ухудшения качества спермы
  • Гормональные нарушения;
  • Инфекционные заболевания репродуктивных органов (Brucella canis, аэробные бактерии);
  • Генетические аномалии (хромосомные аномалии, инбридинг);
  • Медикаментозное лечение (стероиды, противогрибковые препараты, некоторые антибиотики);
  • Другие причины (гипертермия мошонки, возраст, загрязнение окружающей среды (диоксины) и стресс).
Аспермия (отсутствие 2 фракции эякулята)
Причины: стресс, отсутствие либидо, незрелость, не подходит мануальный способ, опухоли клеток Сертоли, гипотиреоз и гиперадренокортицизм, ретроградная эякуляция.
Азооспермия (отсутствие сперматозоидов во 2 фракции)
Причины: закупорка, возникающая в результате аплазии частей придатка, сперматоцеле и гранулемы, иммуноопосредованный орхит с уменьшением размера семенников. Диагноз подтверждается определением уровня ALP в сперме (норма: 5000−20 000 МЕ).
Олигозооспермия (низкая концентрация спермиев в эякуляте)
Причины: частые вязки, гипертермия, патологии простаты, ретроградная эякуляция, гипотитероидизм, Кушинг.
Тератозооспермия (>30% аномальных форм)
Причины: неоплазия семенников, орхит, простатит, интерсексуальность, крипторхизм гипертермия, а также причины, описанные при олигозооспермии.
Прогноз: снижение фертильности.
Астенозооспермия (прогрессирующая подвижность менее 70%)
Причины включают опухоли семенников, инфекции репродуктивных путей или загрязненное оборудование для сбора крови, а также встречаются идиопатические случаи. Может быть ассоциирована с тератозооспермией.
После проведения исследования мы оформляем полученные результаты на специальном бланке. Первая часть документа описательная: физические свойства спермы, морфология, подвижность, соотношение живых и мертвых спермиев, концентрация. Вторая часть - заключение, состоит из перечисления нарушений, которые мы диагностировали при исследовании спермы. Например, тератоспермия, астенозооспермия. По результатам исследования, если есть показания, рекомендуем прием репродуктолога и повторное исследование в динамике.
Спермограмма — ключевой метод диагностики репродуктивного здоровья самцов. Интерпретация требует учета видовых норм, условий сбора и сопутствующих патологий. 
Список литературы:
Zambelli D., Prati F. Techniques for semen collection in cats // Theriogenology. – 2008. – Vol. 70. – P. 130–135. 
Farstad W. Artificial insemination in dogs: recent advances // Reprod. Domest. Anim. – 2010. – Vol. 45. – P. 50–53.
Barber J. Clinical interpretation of semen analysis in dogs // Vet. Clin. North Am. Small Anim. Pract. – 2018. – Vol. 48. – P. 497–508.
Amann R.P. Reproductive physiology and endocrinology of the dog // Anim. Reprod. Sci. – 1986. – Vol. 12. – P. 5–26.
Platz C.C., Seager S.W.J. Electroejaculation in the cat // Vet. Rec. – 1978. – Vol. 103. – P. 147–150.
Taha M.B., Noakes D.E. The effect of frequent ejaculation on the semen characteristics of dogs // J. Small Anim. Pract. – 1983. – Vol. 24. – P. 309–315.
Payan-Carreira R. Advanced techniques in canine artificial insemination // Vet. J. – 2010. – Vol. 185. – P. 115–120. 
Thomassen R., Farstad W. Current trends in canine reproductive technology // Anim. Reprod. Sci. – 2009. – Vol. 110. – P. 128–133.
Filliers M. et al. Semen collection in cats using medetomidine // Theriogenology. – 2010. – Vol. 74. – P. 1416–1422.
Johnston S.D. Disorders of canine spermatogenesis // Vet. Clin. North Am. Small Anim. Pract. – 1991. – Vol. 21. – P. 609–622.
Другие статьи